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Wie man Beta-Glycerophosphat-Sigma auflöst

Wenn die Adresse mit einem vorhandenen Konto übereinstimmt, erhalten Sie eine E-Mail mit Anweisungen zum Zurücksetzen Ihres Passworts. Wenn die Adresse mit einem vorhandenen Konto übereinstimmt, erhalten Sie eine E-Mail mit Anweisungen zum Abrufen Ihres Benutzernamens. Suchen Sie nach weiteren Artikeln dieses Autors. Injizierbares Hydrogel ist eines der großen Interessen für Tissue Engineering und Zellverkapselung.

In Anbetracht der Genexpression im Zusammenhang mit der extrazellulären Matrix nahmen Typ-II-Kollagen und Aggrecan von NP-Zellen, die in den Hydrogelen kultiviert wurden, stark zu als diejenigen in Monolayer-Kultur. Im Gegenteil, die ungünstige Genexpression, wie die von Typ I-Kollagen, war signifikant verringert. IVD spielt eine wichtige Rolle, indem es als Reaktion auf äußere Belastungen eine ausreichende mechanische Festigkeit bietet und so die Wirbelsäule und das Gehirn vor Schäden schützt.

Die Hauptkomponenten von NP sind Scheibenmatrixproteine, Proteoglycane und Kollagen, die eine gallertartige Struktur aufweisen und daher nach Stoßabsorption eine Elastizität verleihen. Gleichzeitig wird die Integrität des Annulus Fibrosus verschlechtert und es entstehen radiale Risse. Wie bekannt ist der NP ein avaskuläres Gewebe im Körper; Die Nährstoffversorgung hängt von den Kapillaren des umgebenden Gewebes ab und diffundiert über 696 CEPs in die inneren Zellen.

In diesem Zustand kommt es zu einem Anstieg von Typ I-Kollagen und denaturiertem Typ II-Kollagen in der ECM, wohingegen Proteoglycane aufgrund der Aktivierung des matrixabbauenden Enzyms, das die Komponenten der ECM 4, 5 und damit des Gleichgewichts zwischen dem ECM abbaut, verringert sind Der anabole Metabolismus und der katabolische Metabolismus der ECM waren gestört.

Gegenwärtige Strategien wie pharmazeutische Behandlung, physikalische Therapie, Wirbelsäulenfusion, künstlicher Bandscheibenersatz und Diskektomie können die Schmerzen nur lindern, anstatt die degenerierte Bandscheibe zu reparieren.

ECM-basierte und molekülbasierte Therapien bieten im Allgemeinen eine kurzfristige Linderung und können die NP-Funktion nicht vollständig wiederherstellen. Die zellbasierte Therapie gibt ein Licht für die vollständige Wiederherstellung des NP, bei dem die NP-Zellen direkt an den degenerierten NP abgegeben werden, um das Gleichgewicht zwischen Anabolismus und Katabolismus wiederherzustellen und den NP zu regenerieren.

In früheren Studien wurde festgestellt, dass NP-Zellen aufgrund von Ausfällung und Laminierung keine homogene Verteilung aufweisen können, wenn Zellen direkt in den degenerierten NP injiziert werden. Es wurden mehrere Hydrogele hergestellt und als Zellträger für die NP-Regeneration verwendet. Es ist in saurer Lösung löslich und enthält freie Aminogruppen. Roughley et al. In unserer Studie wurde dem wärmeempfindlichen Hydrogel auf Chitosanbasis Gelatine zugesetzt, um die mechanische Festigkeit und die Gelierungseigenschaften zu verbessern.

Gelatine ist ein kostengünstiges, biokompatibles und biologisch abbaubares Biopolymer und kann eine milde Immunreaktion induzieren. Die Biokompatibilität in vitro wurde durch die Lactatdehydrogenase LDH, wasserlösliches Tetrazoliumsalz-1 WST-1 und Gesamt-DNA-Assays zur Bestimmung der Zytotoxizität, der Lebensfähigkeit der Zellen bzw. der Zellzahl bewertet. Chitosan 2. Louis, MO wurde in 0 gelöst. Die 0. Der Prozentsatz der Zytotoxizität wurde unter Verwendung der folgenden Gleichung berechnet: Neuseeländische Kaninchen, die am Tierforschungszentrum des College of Medicine der National Taiwan University gezüchtet wurden, wurden in dieser Studie verwendet und beibehalten in Übereinstimmung mit den Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Labortieren.

Das Medium wurde alle 3 Tage aufgefrischt. Nach jedem Mediumwechsel wurde das Kulturmedium zur weiteren DMMB-Bewertung gesammelt. Die Hydrogelproben wurden am Ende von 3 Wochen gesammelt. Der Gehalt an sulfatiertem GAG wurde durch eine lineare Standardkurve unter Verwendung einer Reihenverdünnung von Condroitin-6-sulfat C4384 berechnet; Sigma. Die für die Echtzeit-PCR verwendeten Zielgene sind in Tabelle 1 aufgeführt. Tabelle 1. Sequenzen von Primern und TaqMan-Sonden.

GAPDH, Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase. Die Gelierungstemperatur nahm auf 33 ab. Die Gelierungstemperaturen für diese Hydrogele betrugen 35. Die Gelierungszeit nahm mit zunehmender Gelatinekonzentration ab.

Die Gelierungszeiten für diese Hydrogele betrugen 602. 5a zeigt das Ergebnis des WST-1-Assays des Hydrogels an den Tagen 1 und 3. Der OD-Wert am Tag 3 war höher als am 698 Tag 1. Zytotoxizität der entwickelten Hydrogele gegenüber NP Zellen: NP, Nucleus Pulposus. GAG, Glycosaminoglycan. Die Faltzahl der Monoschicht-kultivierten Gruppe wurde für jede Genexpression als 1 ausgelegt und dann mit den beiden Hydrogelgruppen verglichen.

Chenite et al. Cho et al. Diese 700 könnten die wichtigsten molekularen Kräfte sein, die an der Gelbildung beteiligt sind. Gleichzeitig kann die niedrige Temperatur auch die Mobilität von Chitosanmolekülen verringern, was die Assoziation von Chitosanketten weiter verhindert. Es ist daher eine schlechte Konformation oder Form, eine 3D-Netzwerkstruktur aufzubauen, da es schwierig ist, Kontakte zwischen den Verbindungsketten herzustellen. Wenn die Temperatur erhöht wird, werden die intermolekularen Wasserstoffbrückenwechselwirkungen verringert und die das Polymer umgebenden angeregten Wassermoleküle werden entfernt.

Die entwässerten hydrophoben Chitosanketten und Gelatinemoleküle verwickelten sich. Als Ergebnis wurde ein Gel gebildet.

Diese Art der wärmeempfindlichen Gelierung wurde auch in anderen Fällen beobachtet. Das Gel zeigte aufgrund starker hydrophober Reaktionen zwischen Molekülen eine bessere Festigkeit und optimale Gelierungszeit.

Molinaro et al. GAGs sind an das Kernprotein von Aggrecan gebunden, das die am häufigsten vorkommende Art von Proteoglykanen ist. Der erfolgreiche Zellträger erhält nicht nur eine mechanische Unterstützung, sondern bietet auch eine spezifische Mikroumgebung, die die Zellfunktion aufrechterhalten oder ECM produzieren kann. Ferner zeigt die mRNA-Genexpression Fig. Diese Ergebnisse zeigen, dass von NP-Zellen synthetisierte Proteoglycane in Hydrogelen zurückgehalten werden können, anstatt in Kulturmedium verloren zu gehen.

Typ II-Kollagen und Proteoglycane sind die Haupt-Disc-Matrix-Proteine ​​von NP. In den degenerierten Scheiben stieg der Gehalt an denaturiertem Typ II-Kollagen und Typ I-Kollagen aufgrund der Änderung des NP-Zellverhaltens an. Das Molekulargewicht von Proteoglykanen wurde verringert, weil NP-Zellen einen Teil ihrer Funktionen verloren.

Im Gegensatz dazu war die Expression von unerwünschtem Typ I-Kollagen in den beiden Hydrogelgruppen stark verringert. Dies zeigt an, dass die Zusammensetzung und Struktur von Chitosan denen von Proteoglykanen nahe kommt und die Zusammensetzung von Gelatine der von Kollagen ähnlich ist. Das entwickelte Hydrogel bietet ein 3D-Gerüst und hat einen höheren Wassergehalt als die Mikroumgebung von NP-Zellen im lebenden Gewebe.

Alle diese Faktoren tragen zur hohen Expression gewünschter ECM-Gene und zur Hemmung unerwünschter Genexpression bei. Gemäß den Ergebnissen der mRNA-Genexpression kann das Hydrogel eine geeignete Mikroumgebung bereitstellen, die die Funktion von NP-Zellen aufrechterhält und die Synthese der gewünschten ECM verbessert. Ein ähnliches Ergebnis wurde in unserer Studie beobachtet. NP-Zellen halten im Allgemeinen das Gleichgewicht zwischen der Synthese und dem Abbau von ECM-Makromolekülen aufrecht.

Die kompakte Netzwerkstruktur implizierte, dass eine hohe Effizienz der ECM-Retention und Rückkopplungshemmung zu erwarten ist. Diese Eigenschaften machen dieses Hydrogel für eine mögliche Anwendung beim Tissue Engineering von IVD geeignet. Es bestehen keine konkurrierenden finanziellen Interessen. Melden Sie sich bei Ihrem Konto-Benutzernamen an. Passwort vergessen? Lass mich eingeloggt. Neuer Benutzer. Kennwort ändern. Altes Passwort. Neues Kennwort. Passwort erfolgreich geändert Ihr Passwort wurde geändert.

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Tissue Engineering Part A Vol. Online veröffentlicht: Zusammenfassung Injizierbares Hydrogel ist eines der Hauptinteressen für Tissue Engineering und Zellverkapselung. Referenzen 1 Humzah M. Soames R. Menschliche Bandscheibe: Humzah, M. Anat Rec 220, 337, 1988. Biologie der Alterung und Degeneration der Bandscheibe: Roughley, P.

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